Technologie výroby mycelia – pěstování hub

Mateřská kultura (mycelium) se získává jako výsledek výsevu spor, izolace z části plodnice a jako výsledek šlechtitelské práce. Jako živná média pro kultivaci vyšších bazidiomycet se doporučují následující:

– mladinový agar: pro jeho přípravu vezměte 1 litr pivní mladiny 7-8 stupňů. Podle Ballinga přidejte 20 g agar-agaru a vařte, dokud se úplně nerozpustí. Horký mladinový agar se nalije do zkumavek (přibližně 1/3 objemu), uzavře se zátkou z bavlněné gázy a sterilizuje se půl hodiny při tlaku 1,5 atmosféry a teplotě 101 stupňů. C. Po sterilizaci

zkumavky se položí na stůl v silně nakloněné poloze tak, aby médium nedosahovalo k zátce o 3-4 cm a mělo při ztuhnutí velký povrch;

• – ovesný agar: ovesné vločky – 30 g, voda – 970 ml, agar – 15 g. Ovesné vločky se za míchání vaří 1 hodinu ve vodě, poté se přefiltrují přes Gauseův filtr;
• – mrkvový agar: mrkvový extrakt – 400 ml, voda – 600 ml, agar – 15 g, pH = 6,0. Rozdrcenou mrkev smícháme s vodou v poměru 2:5, vaříme 30 minut, přefiltrujeme.

Kromě výše uvedených příkladů živných médií existuje řada dalších. Nejčastěji se používá mladinový agar.

Po ztuhnutí média se do zkumavky za sterilních podmínek vloží mateřská kultura, spory nebo část plodnice houby.

Rýže. 1. Fáze pěstování semenného mycelia:

1 – kousek plodnice houby; 2 — zkumavka s čistou kulturou; 3 — Petriho miska s houbovou kulturou; 4 – láhev na mléko s obilným myceliem; 5 – třílitrová nádoba s myceliem; 6 – hotové semenné mycelium v ​​plastovém sáčku

Tato operace se provádí pomocí očkovací smyčky, kterou lze vyrobit z obyčejné pletací jehlice nebo ocelového drátu, ohnout její konec o 100 mm a zbrousit na nic. Aby se zabránilo vniknutí cizích mikroorganismů, očkovací smyčka se před použitím zahřeje na otevřeném ohni. Poté, pokud se k získání kultury použije část plodnice, houba se opatrně rozlomí na dvě poloviny a z horní části stonku se pomocí očkovací kličky vyřízne kousek houbové tkáně. Pro zajištění sterility se ponoří do peroxidu vodíku a poté se nad plamenem hořáku otevře zkumavka se živnou půdou a na ni se položí kousek houbové tkáně. Smyčka se odstraní, zkumavka se uzavře zátkou předem vypálenou nad ohněm. Při této operaci nelze korek položit na stůl, drží se malíčkem pravé ruky (obr. 2).

Rýže. 2. Sled operací při přidávání kousku plodnice houby do sterilní živné půdy

Po dobu přerůstání se zkumavky umístí do termostatu nebo zatemněné místnosti s teplotou vzduchu 24 stupňů. C. Po několika týdnech podhoubí zcela ovládne živnou půdu a může být použito k další reprodukci. Zásobní kultury se skladují při teplotě 1-2 stupňů. C, každoroční výsev na čerstvou živnou půdu. Při dlouhodobém skladování a častém přesazování matečných kultur se provádí mikrobiologická kontrola.

Při pěstování žampionů se jako semenný materiál používá kompost a obilné mycelium. Pro přípravu kompostového mycelia vezměte hotový žampionový kompost připravený výše popsanou technologií a vložte jej do třílitrových nádob. Sklenice se naplní do 2/3 objemu, substrát se zhutní, ve středu kompostu se udělá otvor o průměru 2,5-3 cm, poté se sklenice sroluje kovovým víčkem s otvor o průměru 2,5-3 cm, otvor se ucpe zátkou z bavlněné gázy. Sklenice kompostu se sterilizují v autoklávech po dobu 1,5-2 hodin při tlaku 2 atmosféry.

Po vychladnutí substrátu na 24 stupňů. Ve speciální sterilní místnosti (box, očkovací místnost) se do sklenice přidá čistá kultura houby pěstované na živném médiu nebo na obilí.

Do každé sklenice se otvorem ve víčku přidá 25-35 g obilného mycelia nebo obsah jedné zkumavky s čistou kulturou. Pokud se provádí inokulace kulturou pěstovanou na agarovém médiu, pak za účelem oddělení obsahu zkumavky od jejích stěn se zkumavka a očkovací smyčka podrží nějakou dobu nad plamenem hořáku. Poté se zkumavka otevře nad plamenem, vloží se do ní očkovací smyčka a médium s čistou kulturou se ze skla sloupne.

Poté rychle odstraňte zátku z víčka nádoby a pomocí očkovací smyčky přidejte obsah zkumavky do nádoby. Otvor ve víčku sklenice se okamžitě uzavře (obr. 3).

Rýže. 3. Přidání čisté kultury do sterilního substrátu pro získání kompostového mycelia

Podrobněji se zastavíme u přípravy obilí. Pro získání obilného mycelia přidejte na 10 kg obilí 15 litrů vody a vařte podle tvrdosti zrna 0,5-1 hodinu na mírném ohni. Hotové zrno by nemělo být převařené, ale měkké. K výrobě žampionového podhoubí budete muset zrno vařit o něco déle než připravovat podhoubí hlívy ústřičné. Poté se voda slije a zrno se položí na čistý povrch ve 2-3 cm vrstvě, aby uschlo. Někdy se pro urychlení procesu povrchového sušení zrna používá zařízení znázorněné na Obr. 4., skládající se z dřevěné bedny 1 se zabudovaným běžným pokojovým ventilátorem. Horní část krabice je pokryta jemnou síťovinou 3, na kterou je nasypáno obilí 4. Do zrna se přidá 120 g sádry a 30 g křídy.

Rýže. 4. Zařízení pro urychlené sušení obilí

Touto operací se reguluje kyselost substrátu a zlepšuje se jeho struktura. Poté se obilí plní do litrových mléčných lahví, jedno-, dvou-, třílitrových sklenic nebo polypropylenových sáčků. Nádoby se uzavřou zátkami z bavlněné gázy a umístí do autoklávu.

Autoklávování se provádí po dobu 1-1,5 hodiny při tlaku 2 atmosféry. Po ochlazení substrátu se nádoby přenesou do očkovací místnosti, zapne se baktericidní lampa a nechá se hodinu. 15 minut po zhasnutí baktericidní lampy se do nádob se sterilním zrnem přidá mycelium stejným způsobem jako při výrobě kompostového mycelia popsaného výše.

Po naočkování se nádoby umístí do termostatů s teplotou 24 stupňů. C, dokud není substrát zcela absorbován myceliem. Kvalitní obilné mycelium lze použít k výsevu nových nádob s obilím, podle druhu houby může být takových dosevů 5-7, po kterých je nutné znovu použít čerstvou mateřskou kulturu.

Hotové obilné mycelium (pokud byly při jeho výrobě použity skleněné obaly) se balí do plastových sáčků a prodává se a skleněné obaly slouží k další výrobě mycelia. Polypropylenové sáčky se používají jednorázově, při použití odpadá nutnost balení a snižuje se pravděpodobnost vniknutí cizích mikroorganismů do zrna.

Mycelium zrn lze skladovat při teplotě 0+2 stupňů. Od 3-4 měsíců a kompost – asi rok.

Během kultivace by měly být nádoby s vyvíjejícím se myceliem pravidelně kontrolovány. Pokud jsou na zrnu zjištěny zelené, hnědé nebo oranžové skvrny (plísňové kontaminanty) nebo tmavá zrnka sliznice a kapalina s charakteristickým zápachem (bakteriální kontaminace), jsou tyto nádoby okamžitě odstraněny z temperované místnosti a sterilizovány v autoklávu speciálně určeném pro za tímto účelem při tlaku 2 až 2,5 atmosfér po dobu dvou hodin.

Rychlost růstu mycelia různých druhů hub není stejná. Podhoubí hlívy ústřičné je tedy schopno zvládnout objem obilí umístěného v litrové láhvi mléka za týden, zatímco kroužkové houby a žampiony na to budou potřebovat třikrát tolik času. Tyto vlastnosti je třeba vzít v úvahu při výrobě mycelia.

Existuje mnoho způsobů, jak získat houbové mycelium. V tomto článku vám řekneme, jak můžete získat houbové mycelium na obilí doma vlastníma rukama. Profesionální přístup se v mnoha ohledech liší od řemeslné výroby, protože ne každý si může dovolit drahé vybavení. Je možné pěstovat houbové mycelium doma? Ano jistě. Takže první věci.

Jaké houby lze pěstovat pomocí obilného mycelia

Tato metoda je vhodná pro všechny stromové houby, jako je hlíva ústřičná, shiitake, zimní medonosná houba (flammulina), letní medová houba, podzimní medonosná houba, hericium a mnoho dalších hub rostoucích na dřevě.

Hlavní metody získávání mycelia zrna

Všechny metody lze rozdělit do dvou skupin:

• za použití agar-agarového média s následným přenesením na zrno;
• přímo na zrno, bez použití agar-agarového média.

V obou případech je zdrojem mycelium buď mycelium na palicích, nebo výtrusy či úlomky houby s výtrusy. Někdy se mycelium získává na agaru přenosem z jiného podobného média na agar. Obilnost se může lišit. Patří sem pšenice, žito, oves, ječmen atd.

Jak připravit agar-agarové médium (šikmý agar)

Existuje několik způsobů, jak připravit agar-agarové médium. Pojďme si popsat metodu, která je podle nás osvědčená a účinná. Nejprve si musíte připravit výživný čaj a poté na jeho základě připravit agarové médium.

Jak připravit výživný čaj

Všechny hmotnostní poměry jsou založeny na 10 sklenicích šikmého agaru.

• nasekaná sláma o objemu asi 1 litr;
• ječmen – 1 šálek.

Slámu a ječmen, omytou od prachu, dejte do hrnce a přidejte vodu tak, aby pokryla všechny součásti. Zapálit. Vařte 40 – 50 minut od varu. Poté ochlaďte a přeceďte přes 2 vrstvy gázy.

Jak připravit agar šikmé

• výživný čaj – 500 ml;
• syrové brambory – 100 g;
• ječmen – 50 g;
• cukr nebo med – 5 g;
• agar-agar – 4 g.

Ječmen lze nahradit pšenicí.

Do kastrůlku nalijeme 500 ml výživného čaje, přidáme oloupané a na kousky nakrájené brambory a ječmen. Zapálit. Vařte 40 – 45 minut. Ochlaďte a přefiltrujte přes 2 vrstvy gázy. Do výsledného odvaru přidejte výživný čaj na 1 litr. Znovu zahřejte k varu a ihned přidejte cukr (nebo med), agar-agar, míchejte, dokud se úplně nerozpustí, vychladněte a nalijte do sklenic. Tloušťka agarové vrstvy by neměla být příliš silná. Obvykle 1 – 2 cm Poté uzavřete šroubovacím uzávěrem s filtrem.

Jak vyrobit filtr na plechovky

Ve víku se vyvrtá otvor a rozšíří se na 2-2,5 cm, do kterého je třeba vložit vatu tak, aby byla v otvoru pevně upevněna. Filtr se sterilizuje spolu se sklenicemi.

Poté, co jsou agarové nádoby uzavřeny šroubovacím uzávěrem s filtrem, musí být autoklávovány. Začínající houbaři občas místo autoklávu používají tlakový hrnec. Takto sterilizujeme 40 minut při teplotě 120 °C.

Naočkování šikmých agarů myceliem na tyčinky

alkohol, vata, rukavice, pinzeta, kahan (nebo suchý líh), zápalky, mycelium na tyčinkách, sterilní agarové sklenice, lihový fix.

Inokulace se nejlépe provádí ve speciální krabici. Pokud ho nemáte, můžete to udělat v malé místnosti. Krabice nebo místnost se dezinfikuje ošetřením křemenem a začíná očkování.

Vatou namočenou v alkoholu otřete rukavice, sklenice a víčka zvenčí a obaly s tyčinkami. Pinzetu zahřejte nad hořákem a ochlaďte v nádobě s alkoholem. Uvolněte víčka agarových nádob.

Poté se mycelium na tyčinkách vyjme z obalu pomocí pinzety, spustí se na dno agarové nádoby a uzavře se šroubovacím uzávěrem s filtrem.

Tento postup by měl být proveden co nejrychleji, aby se snížila pravděpodobnost, že se do sklenice dostanou cizí spory a bakterie. Nemůžete mluvit, tím méně kýchat a kašlat. Dutina ústní a nosní obsahuje obrovské množství různých mikroorganismů. Lékařská maska ​​rozhodně neuškodí. Značka na sklenici označuje název houby a datum očkování.

Po dokončení očkování se sklenice nechají uvnitř při pokojové teplotě mimo přímé sluneční světlo.

Naočkování šikmých agarů sporami hub

alkohol, vata, rukavice, 3% roztok peroxidu vodíku, kahan (nebo suchý líh), zápalky, pinzeta, dvě malé nádobky (na peroxid vodíku a alkohol), mycelium na tyčinkách, sterilní sklenice s agarem, lihový fix.

Postup je obdobný jako v předchozím, jen s tím rozdílem, že místo tyčinek se na dno agarové nádoby položí malý kousek houby o velikosti cca 10×2 mm. Odebírá se ze středu čepice. K tomu ho rukama rozlomí napůl. Před vložením úlomku houby do sklenice se nejprve na 2 sekundy ponoří do roztoku peroxidu vodíku. Neměli byste jej držet déle než 2 sekundy, protože. Spory hub můžete spálit. Sklenice jsou uzavřeny šroubovacím uzávěrem s filtrem. Značka na sklenici označuje název houby a datum očkování.

Doba přerůstání agaru se může u různých hub lišit, obvykle však 2 – 4 týdny.

Po pokrytí povrchu agaru stejnoměrnou vrstvou mycelia se zrno naočkuje.

Inokulace zrna

Chcete-li přenést mycelium na zrno, vyberte sklenice bez cizích inkluzí nebo skvrn. Naočkování zrna se provádí stejně jako naočkování šikmého agaru, v krabičce po dezinfekci křemennými lampami.

Existují dva způsoby očkování. První spočívá v přemístění kousků agaru s myceliem do nádoby s obilím a ve druhém naopak nasypání zrna do sklenice s myceliem na agaru. V prvním případě by měla být sklenice s agarem mělká, ale široká, takže je pohodlnější odstranit mycelium, a ve druhém případě by měla být dostatečně hluboká, aby se do ní vešlo celé zrno.

Po naočkování zrna se sklenice uzavřou víčkem s filtrem a protřepou, aby se mycelium rovnoměrně rozprostřelo. Poté jsou umístěny v místnosti při pokojové teplotě (20 -23 ° C) mimo přímé sluneční světlo.

Po prorůstání celé obilné hmoty myceliem, obvykle po 3-4 týdnech, začíná očkování dřevnatého substrátu. Zbylé obilné mycelium lze skladovat v lednici až 1 měsíc při teplotě 4-6 °C.

Nulové mycelium bez použití agar-agaru

Mycelium na tyčinkách, vařené obilí, líh, sterilní vata, rukavice, kahan (nebo suchý líh), zápalky, pinzeta, páska, plastové sáčky, lihový značkovač, filtrační hadičky (z polypropylenu nebo pouzdra na jednorázové stříkačky).

Jak vyrobit sáčkový filtr

Postačí jakýkoliv kus plastové trubky o průměru 1,5 – 2,0 cm a délce 5 – 6 cm, například z polypropylenu. Můžete také použít jednorázovou injekční stříkačku odstraněním pístu a odříznutím konce kanyly.

Taková trubice se obvykle dezinfikuje alkoholem. Poté je třeba do něj vložit sterilní vatu.

Jak vařit obilí

Obilí, například pšenici, uvařte do měkka (asi 20-30 minut) a vodu zcela slijte. Je důležité, aby tam nebyla přebytečná voda. Na 1 kg uvařeného obilí přidáme 30 g sádry a 10 g křídy. Sádra a křída by měly být ve formě prášku. Důkladně promíchejte a vložte do sklenice. Používají se plechovky o objemu od 0,7 l do 3,0 l. To závisí na metodě sterilizace. Pokud sterilizujete v troubě, pak pouze 3,0 litru, pokud v tlakovém hrnci, pak 0,7 litru, pokud v autoklávu, pak na tom nezáleží. Zavařovací sklenice se plní až po vrch, přičemž ponechává prostor 5–6 cm pro velké sklenice a asi 3 cm pro malé.

Sterilizace v troubě. Při teplotě 120 °C 2,5-3 hodiny.

Sterilizace v tlakovém hrnci nebo autoklávu. Při teplotě 120 °C 30 – 40 min.

Po vychladnutí můžete začít naočkovat mycelium na tyčinky. Pokud bylo zrno sterilizováno ve 2-3 litrových nádobách, pak se nalije do plastových sáčků. Je důležité, aby tašky byly nové z role. Vezměte druhý balíček z role, protože první nelze považovat za sterilní. Poté sáček s tyčinkami a vnější povrchy sklenic u hrdla otřou alkoholem, sáček mírně pootevře (ne úplně!) a rychle nasadí na hrdlo zavařovací sklenice, sklenici otočte a vytřepejte obilí do pytle. Dále se pinzeta nahřeje na hořáku, ochladí, vezmou se tyčinky a rychle se přenesou do sáčku. Tyčinky se zasouvají co nejhlouběji. 1 balení obsahuje 3 – 4 tyčinky. Poté se trubice ponoří do alkoholu a v horní části sáčku se zajistí páskou. Vložte sterilní vatu do zkumavky.

Bez přelévání do sáčků se obejdete, pokud mají sklenice objem 0,7 – 1,0 litru. Mycelium na tyčinkách se podobně vloží do zrna a uzavře se šroubovacím uzávěrem s filtrem.

Po naočkování vyjměte sáčky nebo sklenice na tmavém místě při teplotě 23-25 ​​°C. Po 3 – 4 týdnech můžete očekávat úplné prorůstání zrna myceliem.

Pokud se vám to napoprvé nepovedlo, nezoufejte, zapracujte na svých chybách a začněte znovu. Tím si procházejí všichni začínající houbaři.